大揭秘!“手撕病毒”,我们有利器!

大揭秘!“手撕病毒”,我们有利器!

 新冠肺炎疫情当前,P3实验室成为“手撕病毒”的秘密武器之一——每天,一份份新冠肺炎核酸检测均在这里开展。病毒究竟在这里是怎样被“揪出来”的?下面就让经济日报记者带您揭开P3实验室的神秘面纱。

  “这里是与病毒‘零距离’接触的地方,整个实验室完全密封,室内处于负压状态,我们喜欢用‘三流’来形容它,即人流、物流、气流的单向流动,确保在里面的污染物不会泄漏到外面而造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国说。

  广东省第二人民医院作为全国首家省级应急医院,拥有国家级应急医学救援队、WHO国际应急医疗队,有着与病毒战斗的丰富经验。而P3实验室,就是该院“手撕病毒”的秘密武器之一。

  通过缓冲间进入到实验室内。

   揭秘一

  前世今生

  P3实验室全称“生物安全防护三级实验室”,P是英文Protection的缩写。

  生物安全防护实验室根据微生物及毒素的危害程度不同分为四级,一级最低,四级最高。其中,四级实验室全球仅有几十家;三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素,其中包括新冠病毒核酸检测。

   揭秘二

  抽丝剥茧

  核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”,而检测流程中的每一个环节都是精细活,容不得半点马虎。在操作中,实验员面对眼前的样本,需要“一个一个地揭开盖子,开盖加样和核酸提取”,这无疑是与病毒的正面交锋。那么,P3实验室的实验员是如何与病毒“过招”的?

  据介绍,实验室内的检测流程可分为5个步骤:样本进入“传递窗”——灭活处理——开盖加样和核心提取——扩增反应判断结果——高压灭菌。

  通过核酸扩增仪进行扩增反应。

  第一步是样本进入实验室。采集的检测样本进入P3实验室前,得先进入一个特殊的窗口——“传递窗”,也叫做空气锁,保证传递样本时带进去的空气被隔离,不污染外部环境。样本在这里开启它在实验室中短暂的一生。

  “传递窗”也叫做Air Lork(空气锁)。

  第二步是检测前的灭活处理。样本在水浴箱经半小时56℃高温灭活,这样检测样本时就会相对安全,但病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。

  第三步是检测的核心环节——开盖加样和核酸提取。广东省第二人民医院检验医学部副主任技师胡亮杉介绍,操作时,实验员要对每一份样本打开瓶盖,吸取转移,且需两个人高度配合才能完成——每一次都是实验员与病毒面对面的“开撕”。

  “样本在开盖转移过程中,病毒非常容易暴露在实验室空气中,与我们几乎是零距离接触。”胡亮杉说,“开盖加样时,拿着微量移液器的手往往因为戴着双重手套,而显得有些笨拙,再加上眼罩、面屏和生物安全柜玻璃窗的三重阻隔,所有动作都显得缓慢,经常是颤抖着左手扶右手完成的。”

  人工核酸提取的步骤更为复杂。“核酸提取可以使用仪器辅助,但由于比对需要,往往要加以人工操作,需要反复进行离心、加试剂、洗涤等10多个步骤,完成一例人工核酸提取要50分钟左右。”胡亮杉说。

  第四步是判断结果。提取的核酸送到核酸检测室内,加入到扩增试剂中,通过仪器进行RT—PCR反应,用时约110分钟,就可分析判断结果为阴性或阳性了。

  根据曲线和参数分析判断结果。

  最后一步是污染物的高压灭菌处理。实验过程产生的污物通过高压灭菌后,按相关普通医疗垃圾处理。

  产生的污物通过高压灭菌后,按相关医疗垃圾处理。

  揭秘三

  安全保障

  下面,再来看看工作人员是如何工作的。

  首先在清洁区内穿戴中级防护服——通过缓冲间进入实验室内负压工作间,在这里进行标本处理,核酸提取及检测——完毕后进行空间、表面消毒,按顺序脱下防护服——通过淋浴间更衣后,回到清洁区。这些步骤一个都不能少!

  标本处理间,在这里进行开盖加样和核酸提取。

  核酸检测的宗旨是高效、有序和安全。其中工作人员的安全是重中之重。为确保安全,广东省第二人民医院采取了多种措施。第一,人员筛选;第二,岗前安全培训;第三,严格消毒灭菌制度;第四,建立感控督导员制度,及时发现相关问题,确保人员身心安全。

  到目前为止,该院P3实验室未出现过生物安全问题。

  揭秘四

  弃伪存真

  在P3实验室,任何一个环节出现问题均可能导致“假阴性”或“假阳性”。为保障检测质量,检测结果将经历重重比对与复核。其中,检测质量的保障措施在检测前就开始了。样本采集的医务人员必须经过严格培训和考核才能上岗,样本的质量与采集的技术密切相关,每一帧动作流程均必须按规定进行,样本采集完后的护送工作需按照严密程序,由专人专道配送到实验室。

  在检测过程中,实验员须谨慎对待每一次测试,不错过任何一个可疑样本。针对可疑样本,将选用不同的试剂复核确定,防止“假阴性”出现;同时,针对阳性样本会进行病毒基因测序比对,以防止“假阳性”出现。

  检测后,实验室将定期随机抽取检测后的样本送第三方实验室检测,保障检测的准确性。

  揭秘五

  所向披靡

  被称为“侦察兵”的该院P3检测团队目前有21人,实行一天三班制。检测团队70%以上是硕士以上学历,均经过分子生物学的培训,拥有PCR上岗证。

  “与战斗在病房里的医护人员不同,他们藏在实验室里,每天与病毒近距离接触,是别人看不见的‘最前线’。”林剑国说。

  广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国博士。

  为严格遵照“新型冠状病毒肺炎诊疗方案”及生物安全要求,检测人员需在P3实验室负压密闭的空间里穿着三级防护装备,5个小时不吃不喝,甚至穿戴成人纸尿裤以解决上厕所的需要,并随时要克服因负压差及严密装备导致的头晕、呕吐等症状,以及克服心理上的恐惧。咽拭子样本是从疑似患者鼻咽部采集,可能含有较多新冠病毒。检测人员从采样罐里拿出样本时,在密闭的环境中很容易借助空气传播,但他们依然无怨无悔地战斗在前线,把好第一道关。(经济日报-中国经济网记者 郑杨)

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